书签 分享 收藏 举报 版权申诉 / 7

类型NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术.pdf

  • 上传人:潇风8805
  • 文档编号:44529375
  • 上传时间:2017-06-17
  • 格式:PDF
  • 页数:7
  • 大小:893KB
  • NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术.pdf_第1页
    NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术.pdf_第2页
    NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术.pdf_第3页
    配套讲稿:

    如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。

    特殊限制:

    部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。

    关 键  词:
    NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术 1186 2006 支原体 肺炎 诊断 技术
    资源描述:
    ICS11,220
    B41
    中华人民共和国农业行业标准
    NY/T1186--2006
    猪支原体肺炎诊断技术
    Diagnostic techniques for swine mycoplasmal pneumonia
    2006-07-10发布
    2006-10-01实施
    中华人民共和国农业部发布
    NY/T1186-2006
    前言
    支原体肺炎又称猪喘气病,是由猪肺炎支原体引起猪的一种接触性传染病,是造成养猪业经济损
    失最重要的疾病之一。本病以咳嗽和气喘为主要临床特征,病变部位主要在肺部,可见心叶、中间叶和
    尖叶有融合性支气管肺炎变化。本病广泛流行于世界各地,欧洲、亚洲、美洲、非洲以及大洋洲等主要养
    猪国家和地区均有发生。
    本标准的附录A为规范性附录。
    本标准由中华人民共和国农业部提出。
    本标淮由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
    本标准起草单位:农业部动物检疫所、西北农林科技大学。
    本标准主要起草人:郑增忍、张衍海、王娟、张彦明。
    NY/T1186-2006
    猪支原体肺炎诊断技术
    范围
    本标准规定了猪支原体肺炎的病原分离和鉴定及间接血凝试验技术。
    本标准适用于猪支原体肺炎的诊断。
    2规范性引用文件
    下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
    的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
    是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
    GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
    3临床诊断和病理学检查
    3.1临床症状
    猪支原体肺炎是一种发病率高死亡率低的慢性呼吸道传染病,主要临床症状为慢性干咳。新发病
    猪群常星急性,张口喘气,痉挛性阵咳,死亡率30%左右。体温升高不明显。咳持续几周或甚至数
    月,育肥绪咳嗽最严重。部分患猪呈腹式呼吸,嘴息沟明显。食欲减退,消瘦,背毛粗糙,生长停滞,病程
    主要分急性、慢性两种类型。
    3.2病理变化
    主要病变见于肺、肺门淋巴结和纵隔淋巴结。急性死亡患猪肺有不同程度的水肿和气肿。肉眼病
    变类似于膨胀不全的肺,尤其在疾病的慢性阶段。特征性病变是两肺的心叶、尖叶和膈叶前缘发生对称
    性的实变,肺门淋巴结肿大。肺中间叶实变,以及肺门淋巴结肿大、増生,病变最初为票粒大至豆大呈均
    匀的散布,逐渐扩展而融合成支气管肺炎。病变部界限明显,灰白色、无弹性,“胰样”、“鱼肉样”。切开
    时,内有大量泡沫。其他器官无明显变化
    3.3病理组织学检查
    典型病变组织通过用常规的病理切片、染色、脱色后观察,支气管和细支气管上皮组织纤毛数量减
    ,小支气管周围的肺泡扩大,泡腔充满多量炎性滲出物,肺泡间组织有淋巴样细胞増生。急性病例中
    扩张的泡腔内充满浆液性渗出物,杂有单核细胞,中性粒细胞,少量淋巴细胞和脱落的肺泡上皮细胞。
    慢性病例,其肺泡腔内的炎性渗出物中,主要是淋巴细胞浸润。
    3.4X线检查
    X线检查对本病的诊断有重要价值,对可疑患猪进行Ⅹ线透视,可作出诊断。在X线检查时,猪只
    以直立背胸位为主,侧位或斜位为辅。病猪在肺野的内侧区以及心膈角区呈现絮状及片状阴影,且肺纹
    理清晰。
    4病原分离和鉴定
    4.1材料准备
    4.1.1培养基
    4.1.1.1A2肉汤:制备方法见附录A.1
    4.1.1.2固体培养基:制备方法见附录A.2。
    NY/T11862006
    4.1.1.3厌气肉肝汤:制备方法见附录A,3。
    4.1.1.4血琼脂平板:按GB4789,28的方法配制。
    4.1.2其他材料
    4.1.2.1灭菌棉拭子。
    4.1.2.2Hank's液:配制方法见附录A.4。
    4.1.2.30.25%鸡红细胞液
    4.2病料采集
    4.2.1活体病料采集:用棉试子深擦病猪的喉头或鼻腔,采集呼吸道分泌物。
    4.2.2死后病料采集:无菌操作采取具有特征的病肺与健肺连接处的肺组织。
    4.3病原分离
    将病肺组织剪成2mm3以下的碎块,浸入 Hank's液中洗涤,除去血液和组织碎块,取3块~5块浸
    泡在盛有5mLA26肉汤的试管中;棉拭子浸入约10mLA26肉汤中清洗,并压出棉花中残液,再经0.45
    1m的滤膜过滤除菌,将滤液分装于试管。将上述试管置于含5%-10%CO2环境或用胶塞塞紧管口,
    在37℃进行培养。1代~3代分离时须每经3d~5d,以20%的接种量连续进行移植;至4代~5代以
    后,再经5d~7d连续转移以提高分离率。同时应设厌气肉肝汤、血琼脂平板作为细菌检查的对照
    通过连续继代,当培养物出现有规则的变化时,应涂片镜检;同时将液体培养物作适当稀释后再接
    种于固体培养基上,在含5%~10%CO2的环境中37℃培养3d~10d。培养时应逐日在低倍镜下观
    察,若出现圆形、边缘整齐、似露滴状、中央有颗粒、稍隆起的小菌落,判为可疑菌落,需进一步进行鉴定。
    4.4病原鉴定
    4.4.1溶血试验
    挑取可疑菌落接种于含猪或鸡红细胞的固体培养基上培养2d~3d,如为猪肺炎支原体,则菌落周
    围无溶血现象。
    4.4.2精氨酸利用试验
    挑取可疑菌落接种于含精氨酸及酚红指示剂的液体培养基中,由于猪肺炎支原体不能分解精氨酸
    产生氨,故指示剂不变色,试验为阴性。
    4.4.3薄膜和斑点形成试验
    挑取可疑菌落接种于含马血清的固体培养基上,由于猪肺炎支原体不能分解其中的脂肪酸,故在固
    体培养基上菌落的表面和周固不能形成薄膜和斑点。
    4.4.4红细胞吸附试验
    将0,25%鸡红细胞液滴加于可疑菌落上,静止后弃去红细胞液,用生理盐水冲洗2次~3次,用低
    倍镜检查,如为猪肺炎支原体可见菌落表面和周围吸附有大量红细胞。
    4.4.5结果判定:以上实验皆为阳性者判为猪肺炎支原体。
    间接血凝试验
    5.1材料准备
    5.1.196孔(12×8)V型(110°)有机玻璃反应板、25L微量移液器、微量振荡器等。
    5.1.2猪肺炎支原体纯化灭活抗原、阳性血清、阴性血清。
    5.1.3敏化红细胞:为猪肺炎支原体纯化灭活抗原致敏的雄性绵羊红细胞。
    5.1.4稀释剂:含1%健康兔血清pH7.2PBSa
    5.2操作方法
    5.2.1血清的处理:取被检血清0.2mL于无菌小试管中,56℃水浴30min灭活,冷却后加入0.3mL
    展开阅读全文
    提示  文档分享网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    关于本文
    本文标题:NYT 1186-2006 猪支原体肺炎诊断技术.pdf
    链接地址:https://www.wdfxw.net/doc44529375.htm
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

    版权所有:www.WDFXW.net 

    鲁ICP备09066343号-25 

    联系QQ: 200681278 或 335718200

    收起
    展开