【发明专利】订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用 CN114605498A.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202210132674.1(22)申请日 2022.02.14(71)申请人 上海大学地址 200444 上海市宝山区上大路99号(72)发明人 胡宏岗汪楠刘超石业娇陈宝宝(74)专利代理机构 北京绥正律师事务所 11776专利代理师 吕平(51)Int.Cl.C07K 7/08(2006.01)C07K 1/04(2006.01)C07K 1/06(2006.01)A61K 38/10(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用(57)摘要本发明涉及医药技术领域， 且公开了订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用， 订书肽类抗肿瘤活性化合物具体指具有式(I)结构的订书肽类活性分子及其药学上可接受的盐或酯：FX1X2X3KKX4X5X6X7X8NX9X10FX11K(I)， 药物组合物含有具有式(I)结构的订书肽类活性分子及药学上可接受的稀释剂、 赋形剂或载体。 该订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用， 旨在增强其细胞渗透性， 提高酶稳定性和抗肿瘤活性。权利要求书1页 说明书8页 附图3页CN 114605498 A2022.06.10CN 114605498 A1.订书肽类抗肿瘤活性化合物， 其特征在于， 具体指具有式(I)结构的订书肽类活性分子及其药学上可接受的盐或酯：FX1X2X3KKX4X5X6X7X8NX9X10FX11K (I)其中， X1表示缬氨酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X2表示天冬氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X3表示亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X4表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X5表示丙氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X6表示天冬酰胺或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X7表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸；X8表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X9表示丝氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X10表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X11表示甘氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； 片段中成对的(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸通过烯烃复分解反应进行环合。2.订书肽类活性分子的药物组合物， 其特征在于， 该药物组合物含有如权利要求1中所述的具有式(I)结构的订书肽类活性分子。3.根据权利要求2所述的订书肽类活性分子的药物组合物， 其特征在于， 其还含有药学上可接受的稀释剂、 赋形剂或载体。4.根据权利要求3所述的订书肽类活性分子的药物组合物， 其特征在于， 其中所述的载体是乙醇、 甘油或水中的一种或多种。5.如权利要求1所述订书肽类抗肿瘤活性化合物或如权利要求2至4任一项所述订书肽类活性分子的药物组合物的应用， 其特征在于， 可用于制备抗肿瘤药物。权利要求书1/1 页2CN 114605498 A2订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用技术领域0001本发明涉及医药技术领域， 具体为订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用， 其具有抑制结直肠癌细胞HCT116,SW480以及LoVo的活性， 可用于制备相关抗癌药物。背景技术0002结直肠癌(colorectal cancer， CRC)是我国临床上高发的癌症之一， 近年来CRC的发病和病死的人数逐年增加。 在我国， CRC发病率在男性和女性中分别排名第4位及第3位，死亡率为第5位及第4位， 城镇居民发病率更高。 美国统计数据结果显示， 在2000年至2013年间， 年龄小于50岁的成年人， CRC发病率增加了22， 而确诊后5年相对存活率为65。 超过80结直肠癌发病为散发性的,也与遗传性或炎症性肠病病史相关。 结直肠癌的病因涉及饮食习惯、 环境因素和慢性炎症性肠病等,其中有腺瘤病史的患者发病风险更高。 同时,结直肠癌受遗传因素的影响也很大,在无家族病史的患者中只偶有发生。 但目前尚不清楚遗传的具体因素。0003抗菌肽长期以来一直被认为是治疗人类癌症的很有前途的候选药物， 因为它们不仅对多种细菌、 真菌、 包膜病毒和原生动物具有细胞毒性， 而且对不同类型的人类癌细胞也具有细胞毒性。 抗菌肽Temporin1CEa(FVDLKKIANIINSIFGK)是从中国褐蛙皮肤分泌物中分离出来的阳离子两亲性 螺旋多肽。 前期研究表明， Temporin1CEa具有抗革兰氏阴性和阳性细菌活性， 以及对MCF7细胞的抗肿瘤活性。 Temporin1CEa对人血细胞具有较低的溶血作用和低毒性。 然而， 线性肽也具有构象不稳定、 透膜能力差以及抗水解酶能力弱等问题亟待解决， 故而提出订书肽类抗肿瘤活性化合物及其制备方法与应用来解决上述所提出的问题。发明内容0004(一)解决的技术问题0005针对现有技术的不足， 本发明提供了订书肽类抗肿瘤活性化合物及药物组合物与应用， 具备增强其细胞渗透性、 提高酶稳定性和抗肿瘤活性等优点， 解决了现有的抗癌多肽药物具有构象不稳定、 透膜能力差以及抗水解酶能力弱的问题。0006(二)技术方案0007为实现上述增强其细胞渗透性、 提高酶稳定性和抗肿瘤活性的目的， 本发明提供如下技术方案： 订书肽类抗肿瘤活性化合物， 具体指具有式(I)结构的订书肽类活性分子及其药学上可接受的盐或酯：0008FX1X2X3KKX4X5X6X7X8NX9X10FX11K (I)0009其中， X1表示缬氨酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X2表示天冬氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X3表示亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X4表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X5表示丙氨酸或(2R)2氨基2甲说明书1/8 页3CN 114605498 A3基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X6表示天冬酰胺或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸； X7表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X8表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X9表示丝氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X10表示异亮氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； X11表示甘氨酸或(2R)2氨基2甲基6庚烯酸； 片段中成对的(2R)2氨基2甲基6庚烯酸或(2R)2氨基2甲基9癸烯酸通过烯烃复分解反应进行环合。0010在本文中，“本发明的订书肽类活性分子” 指的是本发明中具有式(I)所示结构多肽， 在本文中， 这种多肽可以称为 “订书肽类活性分子” ，“多肽片段” 或 “本发明多肽。0011式(I)多肽的N末端的氨基和C末端的羧基以及氨基酸侧链基团可以不进行修饰，也可以在基本不影响本发明多肽活性的前提下进行修饰， 如形成 “药学上可接受的酯” ， N末端氨基基团的修饰包括但不限于脱氨基、 N低级烷基、 N二低级烷基和N酰基修饰， C末端羧基基团的修饰包括但不限于酰胺、 低级烷基酰胺、 二烷基酰胺和低级烷基酯修饰， 本发明多肽N末端的氨基进行乙酰化修饰， 即是Ac， C末端的羧基进行酰胺化修饰， 即是NH2。0012本文所使用的多肽及氨基酸和化学基团的表示方法均为所属领域公认的表示方法， 其中氨基酸的缩写可参照表1中的定义。 特殊氨基酸结构可参照表2中的定义， 在本文中， 若不特别指出， 氨基酸一般指L型的氨基酸。0013表1氨基酸缩写表0014氨基酸三字母缩写一字母缩写氨基酸三字母缩写一字母缩写丙氨酸AlaA亮氨酸LeuL精氨酸ArgR赖氨酸LysK天冬酰胺AsnN蛋氨酸MetM天冬氨酸AspD苯丙氨酸PheF半胱酰胺CysC脯氨酸ProP谷氨酰胺GlnQ丝氨酸SerS谷氨酸GluE苏氨酸ThrT甘氨酸GlyG色氨酸TrpW组氨酸HisH酪氨酸TyrY异亮氨酸IleI缬氨酸ValV0015表2特殊氨基酸缩写表0016氨基酸缩写(2R)2氨基2甲基6庚烯酸S5(2R)2氨基2甲基9癸烯酸R80017“药物上可接受的盐” 指一些小分子酸性或碱性化合物与多肽形成的盐， 一般能够增加多肽的溶解性， 所形成的盐基本上不改变多肽的活性。0018例如， 通常能与本发明多肽形成盐的酸有盐酸、 磷酸、 硫酸、 乙酸、 琥珀酸、 马来酸和柠檬酸等； 能与本发明多肽形成盐的碱有碱金属或碱土金属的氢氧化物、 铵和碳酸盐等。0019本发明多肽的抗肿瘤作用可以通过所属领域常规的实验方法来验证， 如细胞学实验等， 在本发明的具体实施方式中， 优选通过细胞学实验如CCK8法， 通过该试验， 发现本发明所涉及的式(I)订书肽类活性分子都具有体外抗肿瘤作用。说明书2/8 页4CN 114605498 A40020此外， 本发明要解决的另一技术问题是提供了含有式(I)结构的多肽片段的药物组合物， 其可以用于抗肿瘤治疗。0021该组合物可以含有本发明的订书肽类活性分子中的一种或多种， 优选仅含一种。0022该组合物可以含有一种或多种药学上可接受的稀释剂、 赋形剂或载体， 优选该组合物为单位剂量形式， 如片剂、 膜剂、 丸剂、 胶囊(包括持续释放或延迟释放形式)、 粉剂、 颗粒剂、 糖浆剂或乳液剂、 消毒的注射用溶液、 悬浮液或冻干粉末针剂、 气雾剂或液体喷剂、 滴剂自动注射装置或栓剂。0023上述活性药物组分可以与一种无毒的药物学可接受的惰性载体组合在一起， 如乙醇、 甘油、 水或其组合， 本发明式(I)的订书肽类活性分子优选使用消毒的注射用水溶液。0024本发明的药物组合物可通过所属领域技术人员所熟知的给药方式来进行给药， 例如口服、 直肠、 舌下、 肺部、 透皮、 离子透入、 阴道及鼻内给药。 本发明的药物组合物优选胃肠道外给药， 如皮下、 肌内或静脉内注射。0025本发明合成的部分优选化合物的名称、 结构式和质谱数据如表3所示0026表3优选订书肽类活性分子的名称、 结构式和质谱数据说明书3/8 页5CN 114605498 A50027说明书4/8 页6CN 114605498 A600280029为了便于理解， 以下将通过具体的实施例和附图对本发明进行描述， 需要特别指出的是， 这些描述仅仅是示例性的描述， 并不构成对本发明范围的限制。0030(三)有益效果0031与现有技术相比， 本发明提供了订书肽类抗肿瘤活性化合物及其制备方法与应用， 具备以下有益效果：0032该订书肽类抗肿瘤活性化合物及其制备方法与应用， 研究报道， 通过化学手段增强多肽的 螺旋构型， 从而增加其透膜能力和酶稳定性是解决线性多肽成药性差的有效策略， 而其中以订书化环合修饰策略报道最多， 通过特定氨基酸侧链戊烯基发生烯烃复分解反应进行环合， 能够有效提高多肽的结构刚性和巩固 螺旋构型， 从而提高酶耐受性和细胞渗透率， 因此， 我们采用订书化环合修饰策略设计并合成了一系列新型Temporin1CEa订书肽类活性分子， 旨在增强其细胞渗透性， 提高酶稳定性和抗肿瘤活性， 更加适用于癌症病人安全用药。附图说明0033图1为本发明表3中Temporin1CEaSp1结构式示意图；0034图2为本发明表3中Temporin1CEaSp2结构式示意图；0035图3为本发明表3中Temporin1CEaSp3结构式示意图；0036图4为本发明表3中Temporin1CEaSp4结构式示意图；0037图5为本发明表3中Temporin1CEaSp5结构式示意图；0038图6为本发明表3中Temporin1CEaSp6结构式示意图；0039图7为本发明表3中Temporin1CEaSp7结构式示意图。0040图8为本发明表3中Temporin1CEaSp8结构式示意图。0041图9为本发明