【发明专利】一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法 CN104458927A.pdf

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201310429294.5(22)申请日 2013.09.18G01N 30/02(2006.01)(71)申请人 北大方正集团有限公司地址 100871 北京市海淀区成府路 298 号中关村方正大厦 5 层申请人 方正医药研究院有限公司北大国际医院集团有限公司(72)发明人 易崇勤 兰静 郑少辉 郭欲晓(74)专利代理机构 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112代理人 丁业平 张天舒(54) 发明名称一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法(57) 摘要本发明涉及一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法， 所述方法采用高效液相色谱法进行， 所述高效液相色谱法使用手性色谱柱 ES-OVM， 并以乙腈 - 磷酸盐溶液作为流动相，其中所述磷酸盐溶液包含占所述磷酸盐溶液0.1-0.5 体积 % 的三乙胺， 所述磷酸盐溶液的 pH为 4.5-5.5， 并且基于所述流动相的总体积， 所述乙腈的量为大于0体积%且小于等于7体积%。 本发明的方法首次实现了对阿维莫泮及其光学异构体的有效分离， 并且检测精确、 灵敏度高、 操作简便、 成本低， 而且分析时间短， 提高了工作效率， 为该新药的分离分析提供了可靠的指导。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书8页 附图3页(10)申请公布号 CN 104458927 A(43)申请公布日 2015.03.25CN 104458927 A1/1 页21. 一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法， 所述方法采用高效液相色谱法进行， 所述高效液相色谱法使用手性色谱柱 ES-OVM， 并以乙腈 - 磷酸盐溶液作为流动相， 其中所述磷酸盐溶液包含占所述磷酸盐溶液 0.1-0.5 体积 % 的三乙胺， 所述磷酸盐溶液的 pH为 4.5-5.5， 并且基于所述流动相的总体积， 所述乙腈的量为大于 0 体积 % 且小于等于 7 体积 %。2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其中所述磷酸盐溶液包含 0.1 体积 % 的三乙胺 ； 所述磷酸盐溶液的 pH 为 5.0 ； 基于所述流动相的总体积， 所述乙腈的量为 5 体积 %。3. 根据权利要求 1 所述的方法， 其中在所述磷酸盐溶液中， 所述磷酸盐的浓度为0.005-0.05mol/L， 优选为 0.02mol/L。4. 根据权利要求 1 所述的方法， 其中在所述磷酸盐溶液中， 磷酸盐选自磷酸二氢钾、 磷酸氢二钾、 磷酸二氢钠、 磷酸氢二钠、 磷酸二氢铵、 磷酸氢二铵， 其中优选为磷酸氢二钠。5. 根据权利要求 1 所述的方法， 其中所述阿维莫泮存在于缓释型、 控释型或普通型的片剂或胶囊剂中。6. 根据权利要求 1 所述的方法， 其中所述方法包括以下步骤 ：1） 将所述阿维莫泮与乙醇混合， 获得溶解有阿维莫泮的第一溶液 ；2） 将步骤 1） 获得的所述第一溶液与所述流动相混合， 从而获得第二溶液 ；3） 用所述高效液相色谱法检测步骤 2） 获得的所述第二溶液。7. 根据权利要求 6 所述的方法， 其中在所述步骤 2） 中， 所述第二溶液中的阿维莫泮的浓度为 0.2-1.0mg/ml， 优选为 0.5mg/ml。8. 根据权利要求 6 所述的方法， 其中在所述步骤 3） 中， 所述高效液相色谱法所用的手性色谱柱 ES-OVM 的柱温为 25-35， 优选为 30； 检测波长为 271-275nm， 优选为 273nm ； 流速为 0.1-0.3ml/ 分钟， 优选为 0.3ml/ 分钟。9. 根据权利要求 6 所述的方法， 其中所述方法还包括提供包含阿维莫泮及其光学异构体的系统适用性溶液， 并用所述高效液相色谱法对该系统适用性溶液进行检测。10. 根据权利要求 1-9 中任意一项所述的方法用于分离分析阿维莫泮与其对映异构体的混合物、 阿维莫泮与其非对映异构体的混合物、 阿维莫泮与其对映异构体和非对映异构体的混合物、 以及阿维莫泮的对映异构体与阿维莫泮的非对应异构体的混合物中的用途。权 利 要 求 书CN 104458927 A21/8 页3一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法技术领域0001 本发明属于分析化学领域， 具体涉及一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法。背景技术0002 阿维莫泮 （又称阿维莫泮， Alvimopan） 的化学名称为 2(s)-4(R)-3- 羟基苯基 -3(R),4- 二甲基 -1- 哌啶 甲基 -3- 苯丙酰基 氨基 乙酸二水合物， 分子式为C25H32N2O42H2O， 分子量为 460.56， 化学结构式为 ：0003 0004 阿维莫泮为一种高选择性的外在 型阿片受体拮抗剂， 由葛兰素史克 （GSK） 与阿道罗 （Adolor） 公司联合开发。阿片及阿片受体在调节胃肠道机能中有重要的作用， 在手术中， 特别是腹部手术中， 由于使用了阿片类镇痛药物， 胃肠道机能发生失常， 表现为厌食、 恶心、 胀气、 腹胀、 排便减少以及肠梗阻等症状。使用选择性的阿片受体拮抗药可以有效缓解上述症状。药理研究显示， 阿维莫泮对阿片受体具有良好的亲和力， 尤其是对 受体具有高度的选择性。2008 年 5 月 20 日， 美国食品药品监督管理局批准阿维莫泮上市。0005 目前现有的国内外已上市的阿维莫泮及其制剂， 在质量标准中尚未规定其光学异构体的检查项及限度， 这对临床用药的安全性构成了潜在的威胁。而目前现有技术也无法对其所含的光学异构体进行有效地分离， 因此， 目前亟需一种对阿维莫泮进行光学异构体的分离分析方法， 以提高现有的阿维莫泮的内在质量。发明内容0006 为解决上述现有技术中所存在的问题， 本发明提供了一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法。0007 具体而言， 本发明提供了 ：0008 （1） 一种分离分析阿维莫泮及其光学异构体的方法， 所述方法采用高效液相色谱法进行， 所述高效液相色谱法使用手性色谱柱 ES-OVM， 并以乙腈 - 磷酸盐溶液作为流动相，其中所述磷酸盐溶液包含占所述磷酸盐溶液 0.1-0.5 体积 % 的三乙胺， 所述磷酸盐溶液的pH 为 4.5-5.5， 并且基于所述流动相的总体积， 所述乙腈的量为大于 0 体积 % 且小于等于 7体积 %。0009 （2） 根据 （1） 所述的方法， 其中所述磷酸盐溶液包含 0.1 体积 % 的三乙胺 ； 所述磷说 明 书CN 104458927 A32/8 页4酸盐溶液的 pH 为 5.0 ； 基于所述流动相的总体积， 所述乙腈的量为 5 体积 %。0010 （3）根据 （1）所述的方法， 其中在所述磷酸盐溶液中， 所述磷酸盐的浓度为0.005-0.05mol/L， 优选为 0.02mol/L。0011 （4） 根据 （1） 所述的方法， 其中在所述磷酸盐溶液中， 磷酸盐选自磷酸二氢钾、 磷酸氢二钾、 磷酸二氢钠、 磷酸氢二钠、 磷酸二氢铵、 磷酸氢二铵， 其中优选为磷酸氢二钠。0012 （5） 根据 （1） 所述的方法， 其中所述阿维莫泮存在于缓释型、 控释型或普通型的片剂或胶囊剂中。0013 （6） 根据 （1） 所述的方法， 其中所述方法包括以下步骤 ：0014 1） 将所述阿维莫泮与乙醇混合， 获得溶解有阿维莫泮的第一溶液 ；0015 2） 将步骤 1） 获得的所述第一溶液与所述流动相混合， 从而获得第二溶液 ；0016 3） 用所述高效液相色谱法检测步骤 2） 获得的所述第二溶液。0017 （7） 根据 （6） 所述的方法， 其中在所述步骤 2） 中， 所述第二溶液中的阿维莫泮的浓度为 0.2-1.0mg/ml， 优选为 0.5mg/ml。0018 （8） 根据 （6） 所述的方法， 其中在所述步骤 3） 中， 所述高效液相色谱法所用的手性色谱柱 ES-OVM 的柱温为 25-35， 优选为 30； 检测波长为 271-275nm， 优选为 273nm ； 流速为 0.1-0.3ml/ 分钟， 优选为 0.3ml/ 分钟。0019 （9） 根据 （6） 所述的方法， 其中所述方法还包括提供包含阿维莫泮及其光学异构体的系统适用性溶液， 并用所述高效液相色谱法对该系统适用性溶液进行检测。0020 （10） 根据 （1） -（9） 中任意一项所述的方法用于分离分析阿维莫泮与其对映异构体的混合物、 阿维莫泮与其非对映异构体的混合物、 阿维莫泮与其对映异构体和非对映异构体的混合物、 以及阿维莫泮的对映异构体与阿维莫泮的非对应异构体的混合物中的用途。0021 本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果 ：0022 1. 本发明的方法首次实现了阿维莫泮及其光学异构体 （包括对映异构体和非对映异构体） 的有效分离， 这对于阿维莫泮生产过程中的质量控制是非常重要的， 因此本发明能够更好地实现对阿维莫泮的质量控制， 提高最终产品的品质， 保证了其临床用药的安全有效。0023 2. 本发明的方法检测精确、 灵敏度高、 操作简便、 成本低， 而且分析时间短， 提高了工作效率， 为阿维莫泮原料药中的光学异构体的快速检查提供了方便， 同时为该新药的分离分析提供了可靠的指导。附图说明0024 图 1 是实施例 1 中系统适用性溶液 （1） 的高效液相色谱图 ；0025 图 2 是实施例 1 中系统适用性溶液 （2） 的高效液相色谱图 ；0026 图 3 是实施例 1 中系统适用性溶液 （3） 的高效液相色谱图 ；0027 图 4 是实施例 1 中供试品溶液的高效液相色谱图 ；0028 图 5 是对比例 1 中系统适用性溶液的高效液相色谱图。具体实施方式说 明 书CN 104458927 A43/8 页50029 以下通过具体实施方式的描述并参照附图对本发明作进一步说明， 但这并非是对本发明的限制， 本领域技术人员根据本发明的基本思想， 可以做出各种修改或改进， 但是只要不脱离本发明的基本思想， 均在本发明的范围之内。0030 目前已知可以采用高效液相色谱 （HPLC） 法分离分析药物分子中的光学异构体， 以及可以使用手性色谱柱 ES-OVM 来分离分析手性分子。然而， 对药物中所含的光学异构体的分离分析是困难的， 并且要满足临床所需的高精准性、 稳定性和灵敏度更加困难， 需要进行大量的实验摸索。 因此， 用目前现有文献中记载的方法来对阿维莫泮样品进行检测时， 并不能有效地将阿维莫泮与其光学异构体拆分开。0031 为了解决现有技术中所存在的上述问题， 本发明的发明人经过大量的理论分析和试验摸索， 发现阿维莫泮的光学异构体是在合成过程中由手性的侧链引入的， 并且阿维莫泮 （S,3R,4R） 只存在一个对映异构体 （R,3S,4S） 和 2 个非对映异构体 （R,3R,4R） 和（S,3S,4S） 。这是因为 ：0032 根据阿维莫泮的分子结构式可知， 阿维莫泮具有 3 个手性中心， 因此理论上存在 1个对映异构体， 6 个非对映异构体。本发明人通过实际试验摸索发现 ： 前 2 个手性中心是起始物料 A(3R,4R)-3-(3,4- 二甲基 -4- 哌啶基 ) 苯酚 所带来的， 其中起始物料 A 的结构式为 ：0033 0034 起始物料 A 具有 1 个对映异构体 ： (3S,4S)-3-(3,4- 二甲基 -4- 哌啶基 ) 苯酚， 以及2个非对映异构体 ： (3R,4S)-3-(3,4-二甲基-4-哌啶基)苯酚和(3S,4R)-3-(3,4-二甲基 -4- 哌啶基 ) 苯酚。然而， 在合成过程中， 非对映异构体 (3R,4S)-3-(3,4- 二甲基 -4- 哌啶基)苯酚和(3S,4R)-3-(3,4-二甲基-4-哌啶基)苯酚的能量很高， 从能量学角度而言不可能存在。 因此实际上， 起始物料A只可能存在对映异构体(3S,4S)-3-(3,4-二甲基-4-哌啶基 ) 苯酚。0035 另 外 一 个 手 性 中 心 是 中 间 体 C(S,3R,4R)-4