【发明专利】一种中药组合物及其鉴别方法 CN104623271A.pdf

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201310555353.3(22)申请日 2013.11.11A61K 36/8969(2006.01)G01N 30/90(2006.01)(71)申请人 河北以岭医药研究院有限公司地址 050035 河北省石家庄市高新技术开发区天山大街 238 号(72)发明人 李晓燕 赵韶华 安军永 王超秦拢 王猛 李正杰 许红辉(54) 发明名称一种中药组合物及其鉴别方法(57) 摘要本发明公开了一种中药组合物及其鉴别方法， 属于中药领域， 该中药组合物主要是由人参、黄连、 丹参、 葛根、 知母、 何首乌、 淫羊藿等组成， 本发明的鉴别方法准确， 有助于药物的质量控制， 提高药物的安全性和可靠性。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书3页 说明书10页 附图2页(10)申请公布号 CN 104623271 A(43)申请公布日 2015.05.20CN 104623271 A1/3 页21. 一种中药组合物， 其特征在于该中药组合物由下列重量份数的原料药组成 ： 人参50-150、 黄精 60-180、 苍术 40-90、 苦参 30-58、 麦冬 60-180、 地黄 60-110、 何首乌 40-90、 山茱萸 60-180、 茯苓 40-90、 佩兰 35-58、 黄连 35-58、 知母 35-90、 淫羊藿 35-58、 丹参 40-110、葛根 60-180、 荔枝核 80-140、 地骨皮 40-90。2. 根据权利要求 1 所述的中药组合物， 其特征在于该中药组合物的活性成分制备由以下步骤构成 ：a、 按照原料药重量比例称取中药材， 净选、 碎断 ；b、 佩兰、 苍术加5-9倍量水提取挥发油， 提取3-6小时， 挥发油另器收集， 水溶液过滤后备用 ；c、 山茱萸用 5-9 倍量 50-90% 乙醇做溶剂， 浸渍 12-48 小时后， 进行渗漉， 收集渗漉液，回收乙醇， 并浓缩成 60测定相对密度为 1.30-1.35 的稠膏， 烘干， 备用 ；d、 人参、 麦冬、 淫羊藿、 知母、 葛根， 加6-10倍量50-90%乙醇， 回流提取1-3次， 每次1-3小时， 提取液过滤， 回收乙醇， 浓缩成稠膏， 烘干， 备用 ；e、 黄精、 苦参、 地黄、 何首乌、 茯苓、 黄连、 丹参、 荔枝核、 地骨皮， 加 7-11 倍量水， 煎煮1-2 次， 每次 1-3 小时， 提取液过滤， 与步骤 b 中佩兰、 苍术提油后的水溶液合并， 浓缩成清膏， 加乙醇调节醇浓度为 50-80%， 冷藏放置， 过滤， 滤液回收乙醇， 浓缩至稠膏， 烘干， 备用 ；步骤c所得山茱萸干膏、 步骤d所得醇提干膏、 步骤e 所得水提醇沉干膏与步骤b所得挥发油共同构成该中药组合物的活性成分。3. 根据权利要求 1 所述的中药组合物， 其特征在于该中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、 片剂或颗粒剂。4. 根据权利要求 3 所述的中药组合物， 其特征在于该中药组合物颗粒剂的制备由以下步骤构成 ：a、 按照原料药重量比例称取中药材， 净选、 碎断 ；b、 佩兰、 苍术合并， 加 5-9 倍量水， 水蒸汽法提取挥发油， 提取 3-6 小时， 挥发油另器收集， 水溶液过滤后备用 ；c、 山茱萸用 5-9 倍量 50-90% 乙醇做溶剂， 浸渍 12-48 小时后， 进行渗漉， 收集渗漉液，回收乙醇， 并浓缩成 60测定相对密度为 1.30-1.35 的稠膏， 烘干， 备用 ；d、 人参、 麦冬、 淫羊藿、 知母、 葛根， 加6-10倍量50-90%乙醇， 回流提取1-3次， 每次1-3小时， 提取液过滤， 回收乙醇， 浓缩成稠膏， 烘干， 备用 ；e、 黄精、 苦参、 地黄、 制何首乌、 茯苓、 黄连、 丹参、 荔枝核、 地骨皮， 加 7-11 倍量水， 煎煮1-2 次， 每次 1-3 小时， 提取液过滤， 与步骤 b 中佩兰、 苍术提油后的水溶液合并， 浓缩成清膏， 加乙醇调节醇浓度为 50-80%， 冷藏放置， 过滤， 滤液回收乙醇， 浓缩至稠膏， 烘干， 备用 ；f、 将步骤 c 所得山茱萸干膏、 步骤 d 所得醇提干膏、 步骤 e 所得水提醇沉干膏混合均匀， 粉碎， 加入辅料制粒 ；g、 步骤 b 所得挥发油加入乙醇溶解， 喷入步骤 f 所得的颗粒， 混匀， 密闭， 分装， 即得。5. 根据权利要求 3 或 4 所述的中药组合物中人参的鉴别方法， 其特征在于该方法由以下步骤构成 ：a、 取相当于该中药组合物生药量 22-34g 的制剂， 加 80% 甲醇 50ml， 超声处理 20 分钟，滤液置蒸发皿中， 水浴蒸干， 残渣加水 20ml 使溶解， 用三氯甲烷振摇提取 2 次， 每次 20ml，权 利 要 求 书CN 104623271 A22/3 页3弃去三氯甲烷层， 水层用水饱和正丁醇振摇提取3次， 合并正丁醇液， 用1%氢氧化钠溶液洗涤 2 次， 每次 30ml， 再用正丁醇饱和水洗涤 2 次， 水用量为 30ml， 分取正丁醇层， 蒸干， 残渣加甲醇 2ml 使溶解， 作为供试品溶液 ；b、 另取人参对照药材， 同法制成对照药材溶液， 再取人参皂苷 Rg1、 Re、 Rb1对照品， 加甲醇制成每 1ml 各含 0.5mg 的混合溶液， 作为对照品溶液 ；c、 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液、 对照药材溶液及对照品溶液各 5l， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上， 以比例为 50 ： 20:30:10 ： 10 的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸10以下放置的下层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷以 10% 硫酸乙醇溶液， 在 105加热至斑点显色清晰， 供试品色谱中， 在与对照药材和对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的主斑点。6. 根据权利要求 3 或 4 所述的中药组合物中黄连的鉴别方法， 其特征在于该方法由以下步骤构成 ：a、 取相当于该中药组合物生药量11-17g的制剂， 加甲醇10ml， 超声处理20分钟， 滤过，滤液作为供试品溶液 ；b、 另取黄连对照药材， 加甲醇， 超声处理 20 分钟， 滤过， 滤液作为对照药材溶液 ；c、 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照药材溶液各 5l， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上， 以 8:1:1:1 的乙酸乙酯 - 甲醇 - 异丙醇 - 浓氨为展开剂， 在展开槽另一侧加浓氨 1ml， 饱和 5 分钟后， 展开， 取出， 晾干， 置 365nm 紫外光灯下检视， 供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显 2 个以上相同颜色的荧光斑点。7. 根据权利要求 3 或 4 所述的中药组合物中丹参和葛根的鉴别方法， 其特征在于该方法由以下步骤构成 ：a、 取相当于该中药组合物生药量11-17g的制剂， 加甲醇10ml， 超声处理20分钟， 滤过，滤液作为供试品溶液 ；b、 另取丹参对照药材， 加甲醇， 超声处理 20 分钟， 滤过， 滤液作为对照药材溶液， 取葛根素对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ；c、 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液、 丹参对照药材溶液和葛根素对照品溶液各5l， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上， 以5 ： 3 ： 1三氯甲烷-丙酮 - 甲酸为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置饱和氨蒸气中熏至丹参药材斑点显色清晰， 取出，置 365nm 紫外光灯下检视， 供试品色谱中， 在与丹参及葛根素对照品色谱相应的位置上， 分别显相同颜色的荧光主斑点。8. 根据权利要求 3 或 4 所述的中药组合物中知母的鉴别方法， 其特征在于该方法由以下步骤构成 ：a、 取相当于该中药组合物生药量 11-17g 的制剂， 加 50% 丙酮 10ml， 超声处理 20 分钟，滤过， 取滤液作为供试品溶液 ；b、 另取知母对照药材， 同法制成对照药材溶液 ；c、 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照药材溶液各 3l， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 H 薄层板上， 以 6 ： 2 ： 2 正丁醇 - 冰醋酸 - 水为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷以 10% 硫酸乙醇溶液， 在 105加热 5 分钟后， 立即置 365nm 紫外光灯下检视，供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光主斑点。权 利 要 求 书CN 104623271 A33/3 页49. 根据权利要求 3 或 4 所述的中药组合物中何首乌和淫羊藿的鉴别方法， 其特征在于该方法由以下步骤构成 ：a、 取相当于该中药组合物生药量 22-34g 的制剂， 加 80% 甲醇 50ml， 超声处理 20 分钟，滤过， 滤液蒸干， 残渣加水20ml使溶解， 用乙酸乙酯振摇提取2次， 每次20ml， 合并乙酸乙酯液， 蒸干， 残渣加甲醇3ml溶解后， 转移至聚酰胺柱上， 用甲醇3ml洗脱， 收集洗脱液， 作为供试品溶液 ；b、 另取何首乌对照药材， 加甲醇， 超声处理 20 分钟， 滤过， 取滤液置聚酰胺柱上， 收集流出液作为何首乌对照药材溶液， 再取淫羊藿苷对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 0.4mg 的溶液， 作为淫羊藿苷对照品溶液 ；c、 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 3l， 何首乌对照药材溶液和淫羊藿苷对照品溶液各 1l， 分别点于同一聚酰胺薄膜上， 以 5 ： 5 ： 1:0.5:0.5 乙酸乙酯 - 丁酮 - 甲醇 - 甲酸-水为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 立即置365nm紫外光灯下检视， 供试品色谱中， 在与何首乌对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光主斑点， 再喷以 1% 三氯化铝乙醇溶液， 热风吹干， 置 365nm 紫外光灯下检视， 供试品色谱中， 在与淫羊藿苷对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。10. 根据权利要求 1 所述的测定方法， 其特征在于所述苍术为麸炒苍术， 何首乌为制何首乌， 淫羊藿为炙淫羊藿。权 利 要 求 书CN 104623271 A41/10 页5一种中药组合物及其鉴别方法技术领域0001 本发明属于中药领域， 具体涉及中药组合物以及其鉴别方法。背景技术0002 中药治疗疾病已经有几千年的历史了， 随着科学技术的发展， 中药也面临着现代化， 要走上世界市场， 这就要求必须做好中药质量的控制， 中药的成分质量控制则是最关键的， 尤其是对于复方的中药制剂， 要想全面的控制中药的质量， 必须做好各成分的鉴别。0003 该中药组合物由人参、 黄精、 苍术、 苦参、 麦冬、 地黄、 何首乌、 山茱萸、 茯苓、 佩兰、黄连、 知母、 淫羊藿、 丹参、 葛根、 荔枝核、 地骨皮组成。对于该中药组合物， 目前只公开了药物成分和制备方法， 并没有给出相应的药物成分的鉴别方法。发明内容0004 本发明目的是提供一种中药组合物以及鉴别该中药组合物中有效成分的方法。0005 本发明所采用的技术方案是 ：一种中药组合物， 该中药组合物由下列重量份数的原料药组成 ： 人参 50-150、 黄精60-180、 苍术 40-90、 苦参 30-58、 麦冬 60-180、 地黄 60-110、 何首乌 40-90、 山茱萸 60-180、茯苓 40-90、 佩兰 35-58、 黄连 35-58、 知母 35-90、 淫羊藿 35-58、 丹参 40-110、 葛根 60-180、荔枝核 80-140、 地骨皮 40-90。0006 所述的中药组合物的活性成分制备方法由以下步骤构成 ：a、 按照原料药重量比例称取中药材， 净选、 碎断 ；b、 佩兰、 苍术加5-9倍量水提取挥发油， 提取3-6小时， 挥发油另器收集， 水溶液过滤后备用 ；c、 山茱萸用 5-9 倍量 50-90% 乙醇做溶剂， 浸渍 12-48 小时后， 进行渗漉，