DB37T 3626-2019 水产品中石油烃的测定.doc

ICS 67.120.30 B 50       DB37 山东省地方标准 DB 37/T 3626—2019       水产品中石油烃的测定 Determination of petroleum hydrocarbons in fishery products 2019 - 07 - 23发布 2019 - 08 - 23实施 山东省市场监督管理局   发布 DB37/T 3626—2019 目  次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 方法原理 1 4 分子荧光分光光度法 1 4.1 试剂和材料 1 4.2 仪器和设备 2 4.3 样品 2 4.4 分析步骤 2 4.5 结果计算与表示 2 4.6 检出限、回收率和精密度 3 5 紫外分光光度法 3 5.1 试剂和材料 3 5.2 仪器和设备 3 5.3 分析步骤 3 5.4 结果计算与表示 3 5.5 检出限、回收率和精密度 4 前  言 本标准按GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由山东省农业农村厅（原山东省海洋与渔业厅）提出并监督实施。 本标准由山东省渔业标准化技术委员会(TC 03)归口。 本标准起草单位：山东省海洋资源与环境研究院、山东省海洋环境监测中心。 本标准主要起草人：孙珊、齐延民、马元庆、张昀昌、王立明、赵玉庭、由丽萍、李佳蕙、董晓晓、白艳艳、苏博、何鑫、张秀珍。 4 水产品中石油烃的测定 1　 范围 本标准规定了测定水产品中石油烃的分子荧光分光光度法、紫外分光光度法。 本标准适用于鱼类、甲壳类、贝类等主要水产品可食用部分中石油烃的测定。 2　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 GB 17378　海洋监测规范 GB/T 30891　水产品抽样规范 3　 方法原理 试样用氢氧化钠-乙醇水溶液皂化，用二氯甲烷萃取并用氧化铝吸附，蒸发二氯甲烷后使用合适溶剂溶解；在激发波长310 nm，发射波长345 nm处进行荧光分光光度测定；在波长225 nm处进行紫外分光光度测定。 4　 分子荧光分光光度法 4.1　 试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。 4.1.1　 氢氧化钠：优级纯。 4.1.2　 无水乙醇：优级纯。 4.1.3　 氯化钠。 4.1.4　 二氯甲烷：优级纯。 4.1.5　 氧化铝：100目～200目，取氧化铝于陶瓷蒸发皿，置于马弗炉内550 ℃下加热4 h，在炉内冷却至约200 ℃后，移入干燥器中冷却至室温，于磨口玻璃瓶内加盖保存。 4.1.6　 无水硫酸钠：优级纯，处理过程见4.1.5。 4.1.7　 环己烷：优级纯，荧光强度应不超过标准油品(0.1 mg/mL)相对荧光强度的1 %。 4.1.8　 氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠(4.1.1)240 g溶于水中，加水至1 000 mL。 4.1.9　 氯化钠溶液：饱和溶液。 4.1.10　 石油类标准储备液(1 000 mg/L)。 4.1.11　 石油类标准使用液(100 μg/mL)：移取5.00 mL石油类标准储备液 (4.1.10)于50 mL容量瓶中，用环己烷 (4.1.7)稀释至标线，混匀。 4.1.12　 玻璃层析柱：内径10 mm，长约 200 mm，清洗干净，干燥后在柱头装入少许玻璃毛或脱脂棉，待用。 4.1.13　 吸附柱：将使用二氯甲烷(4.1.4)浸泡的氧化铝(4.1.5)缓慢倒入玻璃层析柱(4.1.12)，填充高度约为100 mm，再加入无水硫酸钠 (4.1.6)，填充高度约为10 mm。 4.2　 仪器和设备 4.2.1　 分子荧光光度计：分辨率1.0 nm，狭缝1 nm～20 nm，波长范围200 nm～500 nm，并配有1 cm 石英比色皿。 4.2.2　 分析天平：感量0.001 g； 4.2.3　 旋转蒸发器； 4.2.4　 恒温摇床：频率90 rpm～150 rpm，控温范围30 ℃～50 ℃； 4.2.5　 实验室常用仪器和设备。 4.3　 样品 样品的采集和保存等按照GB 17378、GB/T 30891的规定执行。 4.4　 分析步骤 4.4.1　 工作曲线的测定： a) 分别量取0 mL、0.10 mL、0.30 mL、0.50 mL、0.70 mL、0.90 mL油标准使用溶液 (4.1.11)于具塞圆底瓶中； b) 加入20 mL氢氧化钠溶液(4.1.8)和20 mL无水乙醇(4.1.2)，放入恒温摇床于35 ℃中避光振荡5 h，至混合均匀； c) 混合液转入锥形分液漏斗中，用10 mL二氯甲烷洗涤圆底瓶，合并至锥形分液漏斗中，加30 mL 饱和氯化钠溶液(4.1.9)和100 mL水，剧烈震荡(注意放气)，静置分层 (若分层不好，应延长静置时间)，收集有机相； d) 用10 mL二氯甲烷再萃取一次，合并有机相； e) 35 ℃～45 ℃旋转蒸发近干，用少量二氯甲烷溶解，全量转移至吸附柱(4.1.13)过柱，用10 mL二氯甲烷以2 mL/min的流速淋洗，收集全部淋洗液，旋转蒸发近干； f) 氮吹吹干，准确加入10.0 mL 环己烷涡旋混合，待测； g) 以1 mL环己烷(4.1.7)代替样品，按照步骤4.4.1.b)～4.4.1.f)制备空白试样； h) 将环己烷溶液(4.4.1.f)移入1 cm石英比色皿内，按选定的仪器参数测定相对荧光强度 (Ii)；以同样方法测定空白试样(4.4.1.g)相对荧光强度(Ib)；以相对荧光强度(Ii-Ib)为纵坐标，相应的石油烃的浓度(μg/mL)为横坐标，绘制工作曲线。 4.4.2　 试样的测定：准确称取2 g～5 g(精确至0.001 g)试样，按照4.4.1.b)～4.4.1.f)步骤，制得分析试样，然后测定分析试样的相对荧光强度(Is)，以(Is - Ib)值从工作曲线上查出相应的石油烃的浓度。 4.5　 结果计算与表示 按下式计算试样中石油烃： w1= (m1×V1)/M1 (1) 式中： w1——试样中石油烃的质量分数； m1——从工作曲线上查得的石油烃的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)； V1——环己烷溶液的体积，单位为毫升(mL)； M1——样品的称取量，单位为克(g)。 4.6　 检出限、回收率和精密度 4.6.1　 检出限 本方法检出限为0.2×10-6，定量限为0.6×10-6。 4.6.2　 回收率 本方法回收率范围为90 %～110 %。 4.6.3　 精密度 本方法的批内相对标准偏差小于10 %，批间相对标准偏差小于10 %。 5　 紫外分光光度法 5.1　 试剂和材料 5.1.1　 正己烷：优级纯，在紫外波长225 nm处，以水作参比，透光率大于90 %。 5.1.2　 石油类标准使用液(100 μg/mL)：移取5.00 mL石油类标准储备液(4.1.11)于50 mL容量瓶中，用正己烷稀释至标线，混匀。 5.2　 仪器和设备 5.2.1　 紫外分光光度计：可在225 nm进行透光率、吸光度检测，配有1 cm石英比色皿。 5.2.2　 一般实验室常用仪器和设备。 5.3　 分析步骤 5.3.1　 工作曲线的测定 分别量取0 mL、0.10 mL、0.30 mL、0.50 mL、0.70 mL、0.90 mL油标准使用溶液(5.1.2)，按照4.4.1.b)～4.4.1.e)步骤，制备浓缩液，并以1 ml正己烷(5.1.1)代替样品，制备空白试样浓缩液；氮吹近干，准确加入10.0 mL正己烷涡旋振荡，混合均匀；使用紫外分光光度计在225 nm处测定其吸光值(Ai)及空白试样吸光值(Ab)，将测定数据以吸光值(Ai-Ab)为纵坐标，相应的石油烃的浓度(μg/mL)为横坐标，绘制工作曲线。 5.3.2　 试样的测定 准确称取2 g～5 g(精确至0.001 g)试样，按照4.4.1.b)～4.4.1.e)步骤，氮吹近干，准确加入10.0 mL正己烷涡旋振荡，混合均匀制得分析试样；测定分析试样的吸光值(As)，以(As - Ab)值从工作曲线上查出相应的石油烃的浓度。 5.4　 结果计算与表示 按下式计算试样中石油烃： w 2 = (m2×V2)/M2 (2) 式中： w2——试样中石油烃的质量分数； m2 ——从工作曲线上查得的石油烃的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)； V2 ——正己烷溶液的体积，单位为毫升(mL)； M2 ——样品的称取量，单位为克(g)。 5.5　 检出限、回收率和精密度 5.5.1　 检出限 本方法检出限为0.2×10-6，定量限为0.6×10-6。 5.5.2　 回收率 本方法回收率范围为90 %～110 %。 5.5.3　 精密度 本方法的批内相对标准偏差小于10 %，批间相对标准偏差小于10 %。 _________________________________