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【发明专利】由甘肃道地药材甘松制成的治疗哮喘的药物及其制备方法 CN106421158A.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611159861.X(22)申请日 2016.12.15(71)申请人 甘肃中医药大学地址 730000 甘肃省兰州市城关区定西东路35号(72)发明人 张毅李娟赵鲲鹏刘光炜张弢陈光顺刘峰林(74)专利代理机构 北京高航知识产权代理有限公司 11530代理人 赵永强(51)Int.Cl.A61K 36/84(2006.01)A61K 9/48(2006.01)G01N 30/02(2006.01)A61P 11/06(2006.01) (54)发明名称由甘肃道地药材甘松制成的治疗哮喘的药物及其制备方法(57)摘要本发明涉及中药领域, 具体涉及一种由甘肃省道地药材甘松制成的治疗过敏性哮喘的药物及其制备方法与检测方法。 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松12重量份, 甘青铁线莲12重量份。 该药物制备成片剂、 丸剂、 散剂、 硬胶囊剂、 软胶囊剂、 颗粒剂、 口服液。 本发明药物能够降低血清IL-4、 IL-5和IgE含有量, 升高IFN-水平, 减少肺泡灌洗液中细胞总数和EOS细胞数,改善肺组织形态学变化。权利要求书3页 说明书23页 附图2页CN 106421158 A2017.02.22CN 106421158 A1.一种治疗过敏性哮喘的药物, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松12重量份, 甘青铁线莲12重量份。2.如权利要求1所述药物, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘青铁线莲甘松2重量份, 1重量份。3.如权利要求1所述药物, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松1重量份, 甘青铁线莲2重量份。4.如权利要求1药物, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘甘松1重量份, 青铁线莲1重量份。5.如权利要求14中任意一项所述的药物, 其特征在于, 该药物制备成片剂、 丸剂、 散剂、 硬胶囊剂、 软胶囊剂、 颗粒剂、 口服液。6.如权利要求5所述的药物, 其特征在于, 该药物采用如下方法制备:(1) 取甘松、 甘青铁线莲, 将其进行水蒸气蒸馏提取, 从中提取挥发油, 得挥发油提取物 , 备用;(2) 将甘松、 甘青铁线莲水蒸气蒸馏提取后的水溶液过滤, 得蒸馏后的水溶液, 加热浓缩, 得蒸馏后的水浓缩液, 备用; 保留水蒸气蒸馏提取后的药渣, 备用;(3) 取步骤 (2) 所得水蒸气蒸馏提取后的药渣, 向其中加4倍量的95乙醇回流提取3次, 每次回流提取2小时, 合并乙醇提取液, 滤过, 得乙醇提取液, 回收乙醇并浓缩, 得乙醇提取浓缩液, 备用; 保留乙醇提取后的药渣, 备用;(4) 将步骤 (3) 所得乙醇提取后的药渣加5倍量水煎煮3次, 每次2小时, 合并水提取液, 滤过, 得水提取液, 加热浓缩, 得水提取浓缩液;(5) 将步骤 (3) 所得乙醇提取浓缩液、 步骤 (4) 所得水提取浓缩液、 步骤 (2) 所得蒸馏后的水浓缩液合并, 混匀, 干燥, 粉碎, 再加入步骤 (1) 所得挥发油提取物 , 混匀, 装入胶囊即得。7.一种治疗过敏性哮喘的药物的检测方法, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松12重量份, 甘青铁线莲12重量份; 该药物采用如下方法制备:(1) 取甘松、 甘青铁线莲, 将其进行水蒸气蒸馏提取, 从中提取挥发油, 得挥发油提取物 , 备用;(2) 将甘松、 甘青铁线莲水蒸气蒸馏提取后的水溶液过滤, 得蒸馏后的水溶液, 加热浓缩, 得蒸馏后的水浓缩液, 备用; 保留水蒸气蒸馏提取后的药渣, 备用;(3) 取步骤 (2) 所得水蒸气蒸馏提取后的药渣, 向其中加4倍量的95乙醇回流提取3次, 每次回流提取2小时, 合并乙醇提取液, 滤过, 得乙醇提取液, 回收乙醇并浓缩, 得乙醇提取浓缩液, 备用; 保留乙醇提取后的药渣, 备用;(4) 将步骤 (3) 所得乙醇提取后的药渣加5倍量水煎煮3次, 每次2小时, 合并水提取液, 滤过, 得水提取液, 加热浓缩, 得水提取浓缩液;(5) 将步骤 (3) 所得乙醇提取浓缩液、 步骤 (4) 所得水提取浓缩液、 步骤 (2) 所得蒸馏后的水浓缩液合并, 混匀, 干燥, 粉碎, 再加入步骤 (1) 所得挥发油提取物 , 混匀, 装入胶囊即得;其特征在于, 采用高效液相色谱法进行甘松根酮的含量测定:(1) 色谱条件: 色谱柱: Agilent zorbax-C18; 流动相: 比例为33:67的乙腈-0.05%磷酸溶权利要求书1/3 页2CN 106421158 A2液; 柱温: 30; 流速: 1mL/min; Waters 2420蒸发光散射检测条件: 漂移管温度: 43; 雾化器温度: 35; 氮气压力: 25Psi; 进样量: 10 L;(2) 对照品溶液制备: 精密称取80干燥至恒重的甘松根酮对照品适量, 加甲醇溶解制成每1mL含1mg的对照品溶液;(3) 供试品溶液的制备: 取本品10g, 研细, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 加热水50mL, 振摇使溶解, 分别用60mL、 40mL、 40mL、 40mL的水饱和的正丁醇振摇提取四次, 合并正丁醇液,用氨试液洗涤3次, 每次40mL, 弃去氨液, 回收正丁醇至干, 残渣加水10mL使溶解, 通过D101大孔吸附树脂柱, 以水50mL洗脱, 弃去水液; 再用40乙醇50mL洗脱, 弃去40乙醇洗脱液, 继用70乙醇150mL洗脱, 收集洗脱液, 蒸干, 用甲醇溶解并移至2mL的量瓶内, 加甲醇至刻度,摇匀, 作为供试品溶液;(4) 测定: 分别精密量取上述供试品溶液、 对照品溶液各10 L, 注入高效液相色谱仪, 进行检测。8.一种治疗过敏性哮喘的药物的检测方法, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘青铁线莲12重量份, 甘松12重量份; 该药物采用如下方法制备:(1) 取甘松、 甘青铁线莲, 将其进行水蒸气蒸馏提取, 从中提取挥发油, 得挥发油提取物 , 备用;(2) 将甘松、 甘青铁线莲水蒸气蒸馏提取后的水溶液过滤, 得蒸馏后的水溶液, 加热浓缩, 得蒸馏后的水浓缩液, 备用; 保留水蒸气蒸馏提取后的药渣, 备用;(3) 取步骤 (2) 所得水蒸气蒸馏提取后的药渣, 向其中加4倍量的95乙醇回流提取3次, 每次回流提取2小时, 合并乙醇提取液, 滤过, 得乙醇提取液, 回收乙醇并浓缩, 得乙醇提取浓缩液, 备用; 保留乙醇提取后的药渣, 备用;(4) 将步骤 (3) 所得乙醇提取后的药渣加5倍量水煎煮3次, 每次2小时, 合并水提取液, 滤过, 得水提取液, 加热浓缩, 得水提取浓缩液;(5) 将步骤 (3) 所得乙醇提取浓缩液、 步骤 (4) 所得水提取浓缩液、 步骤 (2) 所得蒸馏后的水浓缩液合并, 混匀, 干燥, 粉碎, 再加入步骤 (1) 所得挥发油提取物 , 混匀, 装入胶囊即得;其特征在于, 采用气相色谱法对甘松薁醇、 角鲨烯进行含量测定:(1) 色谱条件: 色谱柱: HP-5型毛细管柱; 检测器: 氢火焰离子化检测器; 载气: N2, 流量:35mLmL-1; 氢气流量: 50mLmL-1; 空气流量: 480mLmin-1; 分流比: 9: 1; 进样口温度: 270, 检测器温度320; 程序升温: 初始60, 每分钟10升至140, 每分钟20升至280,保持6min; 内标法;(2) 内标溶液的制备: 取环己酮适量, 加无水乙醇溶解并稀释制成每1mL含15.0mg的溶液, 摇匀, 作为内标溶液;(3) 供试品溶液的制备: 精密量取本品1.0mL, 置10mL容量瓶中, 加无水乙醇稀释至刻度, 再精密量取1.0mL, 置10mL容量瓶中, 精密加入内标溶液1.0mL, 加无水乙醇稀释至刻度,摇匀;(4) 对照品溶液的制备: 精密称取甘松薁醇对照品、 角鲨烯对照品适量, 加无水乙醇溶解并稀释制成含甘松薁醇0.350mgmL-1及角鲨烯0.850mgmL-1的对照品储备溶液, 备用;(5) 测定: 分别精密量取上述供试品溶液、 对照品溶液各10 L, 注入气相色谱仪, 进行检权利要求书2/3 页3CN 106421158 A3测。9.一种由甘松、 甘青铁线莲制成的药物在制备治疗支气管哮喘药物中的应用, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松12重量份, 甘青铁线莲12重量份。10.一种由甘松、 甘青铁线莲制成的药物在制备治疗黄褐斑药物中的应用, 其特征在于, 该药物是由以下重量份的原料制成的: 甘松12重量份, 甘青铁线莲12重量份。权利要求书3/3 页4CN 106421158 A4由甘肃道地药材甘松制成的治疗哮喘的药物及其制备方法技术领域0001本发明涉及中药领域, 具体涉及一种由甘松与甘青铁线莲的活性药物及其制备方法。背景技术0002哮喘及过敏性哮喘是一种常见病、 多发病, 属于中医的 “喘证” 范畴。 中医认为, 本病的发生是肺脾肾虚、 痰饮内伏、 痰阻气道、 宣降失常所致。 哮喘是一种以嗜酸性粒细胞(EOS) 、 肥大细胞反应为主, 淋巴细胞和巨噬细胞浸润为辅的气道炎症性疾病。 往往在人的体质下降, 免疫功能低下时发病。 其发病率高居不下, 严重危害人类的身体健康。0003西医治疗哮喘的药物只能起到一时缓解作用, 疗效仍不能令病人满意, 很多药物治疗哮喘可使疼痛缓解, 但停药以后又会反复发作, 哮喘的治疗往往具有持久性和反复性。感染是肺气肿病因中最值得注意的因素之一, 病毒、 细菌和支原体是本病急性加重的重要因素; 职业性粉尘及化学物质, 如烟雾、 过敏原、 工业废气及室内空气污染等, 浓度过大或接触时间过长, 均可能产生与吸烟无关的肺气肿; 大气中的有害气体如二氧化硫、 二氧化氮、氯气等损伤气道粘膜, 使纤毛清除功能下降, 粘液分泌增加, 为细菌感染增加条件; 吸烟是引起肺气肿原因中最重要的, 吸烟者肺气肿的患病率比不吸烟者高28 倍, 烟龄越长, 吸烟量越大, 肺气肿患病率越高。 目前, 各大医院迫切需要一种治疗哮喘期限短、 疗效高、 反复率低的药物。0004过敏性哮喘 (Bronchial asthma) 是以肺部多种细胞特别是肥大细胞、 嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞等浸润和对各种激发因子产生气道高反应为特征的慢性气道炎症疾病, 在易感者中此种炎症可引起反复发作的气促、 喘息、 咳嗽和胸闷等症状, 气道对多种刺激因子反应性增高。 哮喘的发展由炎症前细胞因子介导, 如主要由Th2细胞分泌的IL-4、 IL-5和IL-13, 此外, 由Th1细胞分泌的IFN-抑制Th2细胞分化, 致敏剂诱发的反应还伴随呼吸道内嗜酸细胞 (eosinophil, EOS) 的渗出, EOS是哮喘过敏性气道炎症反应的主要效应细胞, 与哮喘发病之间存在直接因果关系。 已经证实IFN-在胞内细菌感染时有一定的保护作用, 并参与自身免疫病的发生, 在过敏性哮喘中IFN-与气道单核细胞及中性粒细胞浸润有关, 并能抑制Th2细胞产生IL-4进而抑制IgE的分泌, 对哮喘有一定的保护作用。 IgE水平增高在过敏性哮喘、 变应性鼻炎等特应性疾病 (atopic) 中最具特征性, 是诊断哮喘与气道高反应性的重要参考指标, 高水平IgE被认为是在非过敏性哮喘中的危险因素。0005甘松, 败酱科Valerianaceae甘松属Nardostachys DC.植物, 共有3种植物, 分别是甘松N . chinensis Bet .、 匙叶甘松 N . jatamansi ( D . Don) DC . 和大花甘松 N.grandif lora DC.。 甘松属植物均以根及根茎入药, 药用历史非常悠久, 我国常见甘松和匙叶甘松两种, 入药始载于 本草拾遗 , 后列入 海南本草 和 开宝本草 , 认为其具有理气止痛、 开郁醒脾、 安神等功效, 用于治疗脾胃气滞、 脘腹胀痛、 霍乱转筋、 牙痛

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